Il brodo di selenite è un terreno di arricchimento con proprietà selettive, studiato per isolare i batteri patogeni del genere Salmonella (lat. Salmonella). È molto efficace se è necessario rilevare questo particolare patogeno tra gli altri rappresentanti della microflora intestinale. Il terreno viene utilizzato sia per la diagnostica clinica che per scopi sanitari nei test sugli alimenti.
Caratteristiche generali
Il brodo di selenite viene preparato sulla base di una polvere, che è una miscela omogeneizzata di vari componenti della composizione. Il colore del materiale secco può essere giallo chiaro o crema, a seconda del tipo di supporto. La polvere ha proprietà fluide.
Il brodo di selenite pronto è un mezzo liquido trasparente di colore giallo chiaro. Questa massa viene versata in contenitori dove viene effettuata la semina per un'ulteriore incubazione.
Ci sono tre tipi principali di brodo di selenite:
- terreno puro - adatto per l'isolamento della Salmonella da materiale sia clinico che sanitario;
- con l'aggiunta di mannitolo (brodo bicomponente) - progettato per lavorare solo con materiale clinico;
- Mezzo cisteina-selenite - può essere utilizzato per isolare la Salmonella dal biomateriale patologico del paziente (feci, urina, ecc.).
Questi tipi sono leggermente diversi nella composizione e nelle caratteristiche dell'azione.
Il compito principale del brodo di selenite è favorire l'accumulo di salmonella, inibendo la crescita della microflora di accompagnamento. Ciò consente non solo di rilevare l'agente patogeno nel materiale, ma anche di trasferirlo successivamente nell'agar. Il terreno è stato sviluppato da Leifler, che per primo ha scoperto l'effetto selettivo della selenite contro la Salmonella.
Composizione
Il brodo di selenite contiene:
- idrolizzato di caseina;
- lattosio;
- fosfato di sodio;
- idroselenite di sodio.
Il mezzo di selenite-cisteina, oltre a questi componenti, contiene L-cisteina e sodio idrogeno fosfato. La composizione del brodo di mannitolo differisce in quanto invece dell'idrolizzato di caseina include digerito peptico di tessuto animale. Non c'è lattosio in un tale ambiente, ma c'è il mannitolo. Quest'ultimo funge da substrato fermentabile e fornisce le proprietà tamponanti del brodo.
Tutti i componenti della polvere, ad eccezione dell'idroselenito di sodio, sono chiamati condizionatamente parte A e la sostanza selettiva è chiamata parte B.
Il principio di funzionamento e le proprietà dell'ambiente
Il brodo di selenite funziona come supporto di conservazionecon azione selettiva. L'effetto selettivo è dovuto alla tossicità della selenite, che inibisce la crescita della maggior parte dei microrganismi. Allo stesso tempo, i batteri del genere Salmonella sono in grado di ripristinare questo composto, eliminando così l'effetto tossico sulle proprie cellule. Tuttavia, come risultato della reazione, si forma un alcali, che riduce l'effetto dannoso della selenite sulla crescita della microflora associata, e quindi diventa necessario stabilizzare il pH. Questa funzione è svolta da batteri che fermentano il lattosio con formazione di acido. Il tamponamento del mezzo è fornito da fosfato.
Nel brodo bicomponente, il pH è stabilizzato dal mannitolo. Il mezzo di cisteina migliora l'effetto selettivo contro la Salmonella. Tale brodo è efficace per controllare lo sfondo infettivo nei pazienti con uno stadio non acuto della malattia o nei convalescenti.
La manifestazione delle caratteristiche di crescita dei ceppi di riferimento nel terreno può essere osservata dopo 12-24 ore dall'inizio dell'incubazione. In questo caso, la Salmonella forma colonie incolori.
Caratteristiche di cottura
La preparazione del supporto avviene in due fasi. In primo luogo, viene preparata una soluzione con un componente selettivo in ragione di 4 grammi di selenito di sodio per litro di acqua distillata. Quindi aggiungere 19 grammi della polvere principale (parte A). La soluzione viene accuratamente miscelata e riscaldata fino a completa dissoluzione delle particelle, dopodiché viene versata in provette sterili.
Quando si cucina, è importante seguireregime di temperatura, poiché il fluido è instabile al surriscaldamento. La sterilizzazione del brodo può essere effettuata solo a bagnomaria o utilizzare un getto di vapore. La sterilizzazione in autoclave del mezzo è severamente vietata.
