La ricerca sui batteri richiede un lavoro meticoloso con numerose apparecchiature e strumenti. Affinché i microrganismi si moltiplichino il più rapidamente possibile in condizioni di laboratorio e siano in grado di mantenere la normale attività vitale, vengono utilizzati mezzi nutritivi speciali. La loro composizione e le condizioni biofisiche sono adatte alla crescita attiva di una coltura batterica.
Mezzi nutrienti. Microbiologia e altre applicazioni
Le colonie batteriche vengono coltivate in laboratorio su piastre Petri riempite con contenuto gelatinoso o semiliquido. Si tratta di mezzi nutritivi, la cui composizione e proprietà sono il più vicino possibile a quelli naturali per una crescita delle colture di alta qualità.
Tali ambienti sono utilizzati nella ricerca microbiologica e nei laboratori di diagnostica medica. Questi ultimi funzionano più spesso con strisci di batteri patogeni o opportunisti, la cui posizione sistematica è determinata direttamente nell'istituto.
Naturale e sinteticomercoledì
La regola di base per lavorare con i batteri è la corretta selezione del mezzo nutritivo. Deve soddisfare numerosi criteri, tra cui il contenuto di micro e macro elementi, enzimi, un valore costante di acidità, pressione osmotica e persino la percentuale di ossigeno nell'aria.
I mezzi nutritivi sono classificati in due grandi gruppi:
- Ambienti naturali. Tali miscele sono preparate con ingredienti naturali. Può trattarsi di acqua di fiume, parti di piante, letame, verdure, tessuti vegetali e animali, lievito, ecc. Tali ambienti sono caratterizzati da un alto contenuto di sostanze chimiche naturali, la cui varietà favorisce la crescita della coltura batterica. Nonostante questi ovvi vantaggi, gli ambienti naturali non consentono la ricerca specializzata con ceppi batterici specifici.
- Supporti sintetici. Differiscono in quanto la loro composizione chimica è nota nei rapporti esatti di tutti i costituenti. Tali mezzi sono preparati per una specifica coltura di batteri, il cui metabolismo è noto in anticipo al ricercatore. In re altà, per questo motivo, è possibile predisporre un ambiente così sintetico per lo sviluppo di microrganismi. Sono usati per analizzare l'attività vitale dei batteri. Ad esempio, puoi scoprire quali sostanze rilasciano nell'ambiente e quante. I microrganismi cresceranno anche nei mezzi naturali, ma è impossibile tenere traccia di eventuali cambiamenti quantitativi nella composizione a causa dell'ignoranza delle proporzioni iniziali delle sostanze.
Differenziale-ambienti diagnostici
Nel lavorare con i batteri, non possono essere utilizzati solo i normali mezzi nutritivi. La microbiologia è una scienza vasta e quindi, quando si conduce uno studio, a volte è necessario effettuare una selezione di microrganismi per qualche motivo. L'uso di mezzi diagnostici differenziali in laboratorio consente di selezionare le colonie batteriche desiderate su una capsula di Petri in base al segno biochimico della loro attività vitale.
La composizione di tali ambienti include sempre i seguenti componenti:
1. Nutrienti per la crescita cellulare.
2. Substrato analizzato (sostanza).
3. Un indicatore che darà un colore caratteristico quando si verifica una certa reazione.
Un esempio è il mezzo nutritivo diagnostico differenziale "Endo". Viene utilizzato per selezionare colonie di batteri in grado di scomporre il lattosio. Inizialmente, questo mezzo ha un colore rosato. Se una colonia di microrganismi non è in grado di scomporre il lattosio, assume il solito colore bianco. Se i batteri riescono a scomporre questo substrato, assumono un caratteristico colore rosso brillante.
Mercoledì facoltativi
I laboratori diagnostici spesso lavorano con tamponi che contengono molti diversi tipi di batteri. Ovviamente, per un lavoro di qualità, è necessario selezionare in qualche modo le colonie di cui abbiamo bisogno tra decine di estranei. È qui che può aiutare un mezzo di crescita batterico, che è idealmente formulato per supportare un solo tipo di microrganismo.
Ad esempio,un tale ambiente elettivo è adatto solo alla riproduzione di Escherichia coli. Quindi, dalla semina di tanti batteri su una capsula di Petri, vedremo solo colonie della stessa Escherichia coli e non più. Prima di iniziare il lavoro, è necessario conoscere bene il metabolismo del batterio studiato per selezionarlo con successo da una miscela di altre specie.
Mezzi di coltura solidi, semisolidi e liquidi
I batteri possono essere coltivati non solo su substrati solidi. I mezzi nutritivi differiscono l'uno dall' altro nel loro stato di aggregazione, che dipende dalla composizione durante la produzione. Inizialmente hanno tutti una consistenza liquida e quando si aggiunge gelatina o agar in una certa percentuale, la miscela si solidifica.
I terreni di coltura liquidi si trovano solitamente nelle provette. Se diventa necessario far crescere batteri in tali condizioni, aggiungere una soluzione con un campione di coltura e attendere 2-3 giorni. Il risultato può variare: si forma un precipitato, appare un film, galleggiano piccoli fiocchi o si forma una soluzione torbida.
Il mezzo di coltura denso viene spesso utilizzato nella ricerca microbiologica per studiare le proprietà delle colonie batteriche. Tali mezzi sono sempre trasparenti o traslucidi in modo che sia possibile determinare correttamente il colore e la forma della coltura di microrganismi.
Preparazione dei media
Substrati come le miscele di carne e peptone a base di brodo, gelatina o agar sono molto facili da preparare. Se devi trasformare un substrato solido o semiliquido, trasformalo in liquidoaggiungere rispettivamente il 2-3% o lo 0, 2-0, 3% di gelatina o agar. Svolgono un ruolo importante nell'indurimento della miscela, ma non sono una fonte di nutrienti. In questo modo si ottengono mezzi nutritivi adatti alla crescita di una coltura batterica.
