La medicina moderna dispone di metodi diagnostici specifici che consentono di stabilire l'eziologia delle malattie nell'uomo in base alla definizione del patogeno, delle sostanze geneticamente estranee che stimolano la risposta immunitaria, degli acidi nucleici, nonché dei cambiamenti allergici e immunitari che si verificano a causa delle sue azioni. Oggi, la RIA è ampiamente utilizzata in immunologia e virologia, cioè il test radioimmunologico, gli obiettivi dell'impostazione, i componenti, il corso, la cui contabilità, considereremo in questo articolo. Questo test è in grado di rilevare gli antigeni come risultato della loro interazione con gli anticorpi.
Definizione
RIA è un metodo per la diagnosi di sostanze biologicamente attive nei liquidi, che si basa sulla reazione degli antigeni con gli anticorpi quando si utilizzano sostanze analoghe marcate con radionuclidi che hanno speciali sistemi di legame. Dopo la loro interazionesi forma un immunocomplesso, che viene separato e se ne studia la radioattività. È noto che il test radioimmunologico viene eseguito utilizzando kit di reagenti standard.
Ogni reagente è in grado di determinare la concentrazione di una specifica sostanza. Il fluido biologico prelevato da una persona viene miscelato con un reagente, dopo il periodo di incubazione si separano le sostanze radioattive libere e legate, quindi si effettua la radiometria e si calcolano i risultati. Un isotopo di iodio viene utilizzato per etichettare le sostanze. Viene contrassegnato e aggiunto in una certa quantità.
Applicazione
L'analisi radioimmune ha un'ampia applicazione in medicina e microbiologia. È usato per diagnosticare malattie cardiache e vascolari, malattie dell'apparato endocrino e di altri sistemi corporei. Le RIA sono spesso utilizzate anche per identificare la causa dell'infertilità, la patologia dello sviluppo fetale. In oncologia, questa analisi viene effettuata al fine di determinare i marcatori delle neoplasie al fine di poter monitorare l'efficacia del trattamento. In immunologia, la RIA viene utilizzata per studiare la presenza di immunoglobuline, enzimi, proteine e così via nel sangue. Oggi questa analisi consente di rilevare la concentrazione di vari ormoni fino a un milionesimo di grammo. Pertanto, l'analisi del sangue radioimmune è ampiamente utilizzata in cardiologia, oncologia, endocrinologia, ginecologia e virologia.
Metodi RIA
È consuetudine distinguere tra diversi metodi di analisi, a seconda della naturareazioni:
- Il metodo non competitivo è caratterizzato da componenti di reazione come antigeni standard e rilevabili, soluzione tampone, anticorpi marcati con isotopi, alcuni anticorpi che si legano al sorbente. Un antigene viene aggiunto agli anticorpi da testare. Dopo l'incubazione, compaiono complessi antigene-anticorpo, il sorbente viene lavato, vengono aggiunti anticorpi marcati che si legano all'antigene nel complesso. La radioattività dipende dalla concentrazione dell'antigene da testare.
- Il test radioimmunologico competitivo è guidato dalla competizione antigenica. Qui ci sono componenti della reazione come antigeni di controllo e determinati, una soluzione tampone, alcuni anticorpi che si legano al sorbente e un antigene marcato con isotopi. La diagnosi inizia con l'introduzione dell'antigene che viene esaminato. Sul sorbente si forma un complesso antigene-anticorpo. Quindi il sorbente viene lavato e viene iniettato l'antigene marcato. In tal modo, si lega all'anticorpo. Con l'aiuto di contatori, vengono misurate la reazione e la quantità di radioattività. Sarà inversamente proporzionale alla quantità di antigene nel campione.
- Il metodo indiretto è il più comune. In questo caso, il test radioimmunologico del componente di reazione ha come siero di controllo e test, antigeni o anticorpi che si legano al sorbente, anticorpi marcati con isotopi, soluzioni tampone. Gli anticorpi o gli antigeni diagnosticati reagiscono con gli antigeni o gli anticorpi che si legano al sorbente. Quindi l'incubazione viene rimossa, vengono iniettati gli anticorpi etichettati, che si leganocomplessi antigene-anticorpo.
Metodologia di analisi
Quindi, il test radioimmunologico viene eseguito utilizzando reagenti speciali. I set sono standard, quindi non sono ammessi errori o violazioni. I risultati diagnostici sono affidabili. L'analisi viene eseguita al mattino, per questo prelevano sangue venoso da una persona. In laboratorio, il siero viene separato dal sangue, che verrà utilizzato per la RIA. Questo siero viene miscelato con i reagenti. La miscela risultante viene incubata ad una data temperatura in un termostato.
Gli isotopi liberi e legati vengono separati nella miscela risultante. Successivamente, il materiale ricevuto viene esaminato e i risultati vengono calcolati. Il meccanismo del test radioimmunologico ha diverse opzioni. La tecnica sopra descritta è una RIA in fase liquida, poiché tutti i componenti sono allo stato liquido. C'è RIA e fase solida, dove gli anticorpi sono posti in un vettore che non si dissolve in liquido.
Disponibilità della diagnostica
L'uso di questo metodo diagnostico in medicina sta diventando sempre più popolare ogni anno. Recentemente, il test radioimmunologico è diventato un metodo diagnostico standard che può essere prescritto da un medico durante la diagnosi finale. Per molto tempo questo tipo di analisi veniva svolto solo in laboratorio, oggi è diventato un metodo di ricerca comune. Ma RIA richiede l'uso di apparecchiature costose (contatori gamma) e i kit di reagenti hanno una breve durata. Tutto questo è il principale inconveniente di tale analisi, che ne determinacosto costoso.
Inoltre, la RIA ha recentemente iniziato a soppiantare metodi di ricerca più moderni che non richiedono l'interazione con gli isotopi. Questi includono il test immunoenzimatico. Pertanto, RIA è desiderabile in molte cliniche. È stato a lungo utilizzato nelle grandi città e nei centri diagnostici, ma negli ospedali ordinari dei piccoli centri questa analisi non è praticamente utilizzata a causa del suo costo elevato.
Dignità della RIA
Il test radioimmunologico ha molti vantaggi. È abbastanza specifico e ha un'elevata sensibilità, il che consente di determinare la presenza di sostanze biologicamente attive in quantità incredibilmente piccole. Questa analisi viene eseguita in modo molto semplice, una persona è tenuta solo a donare sangue venoso. I risultati dei test sono accurati al 100% e pronti il giorno successivo. RIA può anche essere facilmente automatizzato. Pertanto, questa analisi consente di identificare le proteine che sono prodotti di scarto di batteri infettivi, che indicano la presenza di infezione nel corpo.
Diagnosi in virologia
La RIA più promettente è per la virologia, perché consente di identificare rapidamente gli agenti patogeni virali. Ciò è dovuto al fatto che negli ultimi anni è cresciuta l'incidenza di diverse infezioni, che si stanno diffondendo ad alta velocità, causando mortalità tra le persone. Ciò è particolarmente vero per i paesi che non hanno un livello elevatosviluppo sociale ed economico (i paesi dell'estremo oriente), qui il test radioimmunologico è semplicemente indispensabile. La microbiologia utilizza anche questo metodo diagnostico per rilevare le malattie infettive causate da batteri patogeni. Ad esempio, RIA è ampiamente utilizzato per rilevare la febbre tifoide. Nei primi giorni della malattia, prima della nomina del trattamento, è necessario condurre uno studio sulle feci e sul vomito. Tuttavia, i risultati diagnostici saranno ottenuti dopo molto tempo. Qui RIA viene in soccorso, l'analisi consente di identificare l'agente eziologico della malattia in breve tempo. Una persona dona sangue, il giorno dopo i risultati dello studio sono pronti. Questa analisi aiuta a fare una diagnosi accurata.
Risultati
Il test radioimmunologico è attualmente uno dei metodi diagnostici più sensibili. Viene utilizzato per analizzare qualsiasi sostanza contro la quale è possibile ottenere anticorpi. Questo metodo consente di effettuare molti campioni nel volume più piccolo del liquido indagato, nonché di registrare i risultati nel più breve tempo possibile, poiché può essere completamente automatizzato. Questa analisi è stata sviluppata negli anni '50 da Solomon Burson. Trent'anni dopo, si diffuse. Ad oggi, non esiste un' alternativa al cento per cento alla RIA, poiché l'analisi ha un'elevata sensibilità. RIA è utilizzato in vari rami della medicina, nonché in microbiologia e virologia.
Finalmente
L'uso del metodo in virologia è molto rilevante oggi, poiché dàla capacità di indagare sulla diffusione delle infezioni, fare una diagnosi accurata e prescrivere un trattamento specifico. Questo problema è particolarmente rilevante per i paesi che hanno un basso livello di economia e sviluppo sociale. Inoltre, questa analisi consente di rilevare la quantità di ormoni ed enzimi nel corpo umano. Per ottenere risultati affidabili, il ricercatore deve solo donare il sangue per l'analisi. La medicina non si ferma, insieme al test radioimmunologico, compaiono nuovi metodi di ricerca, ma RIA continua ad essere uno dei leader nella diagnostica medica.
