Il metodo di osservazione microscopica ad immersione prevede l'introduzione di uno speciale liquido tra la lente del dispositivo e l'oggetto in studio. Migliora la luminosità e amplia la portata dell'ingrandimento dell'immagine. Pertanto, l'oggetto può essere notevolmente ingrandito e i suoi elementi più piccoli possono essere esaminati senza cambiare l'attrezzatura. Di conseguenza, il liquido è chiamato immersione. Può servire come una varietà di composizioni. Il più popolare è l'olio per immersione. Considera le sue caratteristiche in modo più dettagliato.
Informazioni generali
Il primo olio da immersione per la microscopia è stato il cedro. Tuttavia, aveva uno svantaggio significativo. Nel tempo le sue proprietà sono cambiate e non ha permesso di ottenere i risultati desiderati. All'aria aperta, il liquido ha iniziato a condensare gradualmente (fino all'indurimento). Di conseguenza, anche l'indice di rifrazione è cambiato. Nel 20° secolo iniziò a essere prodotto olio sintetico per immersione. Questo fluido non presentava la carenza di cui sopra.
Standard dell'olio ad immersione
Chiavei parametri del fluido sono impostati in GOST 13739-78. Secondo lo standard, l'olio per immersione ha:
- indice di rifrazione nd=1.515±0.001;
- trasmittanza nell'intervallo spettrale da 500 a 700 nm con uno spessore dello strato di 1 mm - 95%, da 400 a 480 nm - 92%;
La temperatura ottimale alla quale è possibile utilizzare l'olio per immersione è di 20 gradi. Ci sono anche standard internazionali. Secondo la norma ISO 8036/1, l'indice di rifrazione è 1,518 + 0,0005 e la trasmittanza a 10 mm di strato per l'intervallo spettrale da 500 a 760 nm è del 95% e a 400 nm è del 60%.
I parametri indicati corrispondono a olio per immersione non fluorescente. La norma ISO 8036-1/2 definisce le caratteristiche del liquido per la luminescenza. La trasmittanza nell'intervallo spettrale da 500 a 700 nm in uno strato di 10 mm è del 95%, da 365 a 400 nm - 60%.
Difficoltà di discrepanze nei parametri
Le differenze identificabili negli standard di cui sopra possono comportare il deterioramento delle prestazioni di una particolare lente quando si utilizza un fluido inappropriato. Risultato:
- Il contrasto è ridotto a causa dell'aberrazione sferica.
- Il campo sull'oggetto di ricerca è colorato.
- L'illuminazione nel piano dell'oggetto in studio e nell'area della sua formazione dell'immagine diventa irregolare.
- L'immagine diventa sfocata.
Sfumature
I microscopi ottici hanno un limite superiore di risoluzionepoco più di 100 volte. A questo livello di ingrandimento, l'illuminazione dell'oggetto in studio dovrebbe essere di alta qualità. In caso contrario, l'immagine risultante sarà così scura che sarà impossibile vedere l'oggetto. Il fatto è che la rifrazione e la dispersione della luce si verificano tra il vetro di copertura e l'obiettivo. L'olio per immersione contribuisce alla sua maggiore cattura. Di conseguenza, l'immagine diventa più chiara.
Caratteristiche della rifrazione della luce
Come fai ad avere un quadro chiaro? In diversi mezzi, la rifrazione della luce avviene in modi diversi. Ad esempio, gli angoli di rifrazione dei raggi nell'aria e nel vetro sono diversi. Nel primo caso, l'indicatore è 1,0, nel secondo - 1,5. Questo è il problema principale.
L'uso dell'olio permette di ridurre l'indice di rifrazione dei raggi che attraversano l'oggetto in studio. Il fatto è che il liquido ha lo stesso parametro del vetro. Di conseguenza, si forma un mezzo omogeneo tra il vetrino e la lente e la maggior parte della luce che passa attraverso l'oggetto entra nello strumento. Ciò si traduce in un'immagine chiara.
Punti tecnici
Di norma, i barilotti delle lenti a immersione sono incisi con olio. L'elemento stesso viene utilizzato quando è necessaria un'apertura di 1,0 o più. Tali lenti "ad immersione" sono utilizzate per l'immersione diretta in un liquido. A questo proposito, sono completamente sigillati. Ciò fornisce un'elevata protezione contro i danni causati dall'olio alle lenti.
Classificazione
Gli oli sono usati nella praticadue viscosità: alta (tipo B) e bassa (A). Spesso sulla confezione è possibile trovare informazioni sull'indice di rifrazione. Ad esempio, producono olio per immersione (100 ml), il cui indice di rifrazione è 1,515. I liquidi a bassa viscosità vengono applicati nello spazio aereo e ad alta viscosità - insieme ai condensatori.
Termini di utilizzo
Per avere un'immagine chiara dell'oggetto in studio, devi seguire dei consigli abbastanza semplici:
- Trova l'oggetto in studio sul cursore al centro del campo con un piccolo aumento. Per questo viene utilizzata una lente a basso ingrandimento.
- Ruota la torretta.
- Introdurre l'obiettivo 100x in posizione di lavoro.
- Posiziona una goccia d'olio sul vetrino, la seconda sull'obiettivo.
- Regola la distanza di lavoro con una messa a fuoco precisa finché il soggetto non è chiaramente visibile.
È necessario prestare attenzione durante il lavoro. È importante evitare che l'aria penetri tra il coprioggetto e l'obiettivo.
Olio per immersione "Minimed"
Liquid viene utilizzato quando si lavora con lenti acromatiche e apocromatiche di qualsiasi tipo di dispositivo, ad eccezione di quelli luminescenti. Secondo gli esperti che hanno utilizzato questo olio per immersione, ha diverse proprietà utili. Il liquido migliora notevolmente la visibilità dell'oggetto, riducendo al minimo l'abbagliamento, la perdita di luce e le aberrazioni ottiche. L'uso dell'olio amplia notevolmente la gamma delle capacità delle apparecchiature.
Puliziaattrezzatura
Dopo aver lavorato con olio per immersione, è necessario mettere in ordine il dispositivo. La pulizia deve essere eseguita prima che la lente si asciughi. La carta per lenti pulita viene utilizzata per rimuovere i residui di olio. Un foglio arrotolato viene utilizzato per pulire tutte le superfici di vetro. La carta per lenti deve essere inumidita con una soluzione per lenti e l'olio rimanente deve essere rimosso.
Sfondo storico
Il primo scienziato a spiegare il meccanismo dell'immersione è stato Robert Hooke. Nel 1678 fu pubblicato il suo libro Microscopium, in cui venivano fornite tutte le spiegazioni. Nel 1812, l'immersione fu proposta come mezzo per correggere le aberrazioni della lente. L'autore dell'idea era David Buster. Intorno al 1840 furono realizzate le prime lenti ad immersione. Il loro creatore era D. B. Amici. Inizialmente, i ricercatori hanno utilizzato oli di anice come liquido di immersione. L'indice di rifrazione era vicino a quello del vetro.
